ডাচ গবেষকরা একটি পরীক্ষামূলক পরীক্ষায় CRISPR এবং bioluminescence একত্রিত করেছেনসংক্রামক রোগ

নেদারল্যান্ডসের গবেষকদের মতে, একটি নতুন উন্নত নিশাচর প্রোটিন ভাইরাল রোগের নির্ণয়ের গতি বাড়াতে এবং সহজ করতে পারে।
তাদের গবেষণা, বুধবার ACS পাবলিকেশন্সে প্রকাশিত, উজ্জ্বল উজ্জ্বল নীল বা সবুজ প্রোটিন ব্যবহার করে ভাইরাল নিউক্লিক অ্যাসিড এবং তাদের চেহারা দ্রুত বিশ্লেষণ করার জন্য একটি সংবেদনশীল, এক-পদক্ষেপ পদ্ধতি বর্ণনা করে।
ক্লিনিকাল ডায়াগনস্টিকস, বায়োমেডিকাল গবেষণা, এবং খাদ্য ও পরিবেশগত নিরাপত্তা পর্যবেক্ষণে তাদের নিউক্লিক অ্যাসিড আঙ্গুলের ছাপ সনাক্ত করে প্যাথোজেন সনাক্তকরণ একটি মূল কৌশল।বহুল ব্যবহৃত পরিমাণগত পলিমারেজ চেইন রিঅ্যাকশন (PCR) পরীক্ষাগুলি অত্যন্ত সংবেদনশীল, কিন্তু পরিশীলিত নমুনা প্রস্তুতি বা ফলাফলের ব্যাখ্যার প্রয়োজন হয়, যা কিছু স্বাস্থ্যসেবা সেটিংস বা সংস্থান-সীমিত সেটিংসের জন্য অব্যবহারিক করে তোলে।
নেদারল্যান্ডসের এই গ্রুপটি একটি দ্রুত, বহনযোগ্য এবং সহজে ব্যবহারযোগ্য নিউক্লিক অ্যাসিড ডায়াগনস্টিক পদ্ধতি তৈরি করতে বিশ্ববিদ্যালয় এবং হাসপাতালের বিজ্ঞানীদের মধ্যে সহযোগিতার ফলাফল যা বিভিন্ন সেটিংসে প্রয়োগ করা যেতে পারে।
তারা ফায়ারফ্লাই ফ্ল্যাশ, ফায়ারফ্লাই গ্লোস এবং জলজ ফাইটোপ্ল্যাঙ্কটনের ক্ষুদ্র তারা দ্বারা অনুপ্রাণিত হয়েছিল, যা বায়োলুমিনেসেন্স নামক একটি ঘটনা দ্বারা চালিত হয়েছিল।এই গ্লো-ইন-দ্য-ডার্ক প্রভাব লুসিফেরেজ প্রোটিনের সাথে জড়িত একটি রাসায়নিক বিক্রিয়ার কারণে ঘটে।বিজ্ঞানীরা লুসিফেরেজ প্রোটিনগুলিকে সেন্সরে অন্তর্ভুক্ত করেছেন যা লক্ষ্য খুঁজে পাওয়ার সময় পর্যবেক্ষণের সুবিধার্থে আলো নির্গত করে।যদিও এটি এই সেন্সরগুলিকে পয়েন্ট-অফ-কেয়ার সনাক্তকরণের জন্য আদর্শ করে তোলে, তবে বর্তমানে ক্লিনিকাল ডায়াগনস্টিক পরীক্ষার জন্য প্রয়োজনীয় উচ্চ সংবেদনশীলতার অভাব রয়েছে।যদিও CRISPR জিন সম্পাদনা পদ্ধতি এই ক্ষমতা প্রদান করতে পারে, এটি জটিল, গোলমাল নমুনাগুলিতে উপস্থিত হতে পারে এমন দুর্বল সংকেত সনাক্ত করতে অনেক পদক্ষেপ এবং অতিরিক্ত বিশেষ সরঞ্জামের প্রয়োজন।
গবেষকরা একটি সিআরআইএসপিআর-সম্পর্কিত প্রোটিনকে একটি বায়োলুমিনেসেন্ট সিগন্যালের সাথে একত্রিত করার একটি উপায় খুঁজে পেয়েছেন যা একটি সাধারণ ডিজিটাল ক্যামেরা দিয়ে সনাক্ত করা যেতে পারে।বিশ্লেষণের জন্য পর্যাপ্ত আরএনএ বা ডিএনএ নমুনা ছিল তা নিশ্চিত করার জন্য, গবেষকরা রিকম্বিনেজ পলিমারেজ অ্যামপ্লিফিকেশন (আরপিএ) সঞ্চালন করেছেন, একটি সহজ কৌশল যা প্রায় 100 ডিগ্রি ফারেনহাইট তাপমাত্রায় কাজ করে।তারা লুমিনেসেন্ট নিউক্লিক অ্যাসিড সেন্সর (লুনাস) নামে একটি নতুন প্ল্যাটফর্ম তৈরি করেছে, যেখানে দুটি CRISPR/Cas9 প্রোটিন ভাইরাল জিনোমের বিভিন্ন সংলগ্ন অংশের জন্য নির্দিষ্ট, প্রতিটির উপরে তাদের সাথে সংযুক্ত একটি অনন্য লুসিফেরেজ খণ্ড রয়েছে।
যখন তদন্তকারীরা পরীক্ষা করছেন নির্দিষ্ট ভাইরাল জিনোম উপস্থিত থাকে, তখন দুটি CRISPR/Cas9 প্রোটিন লক্ষ্য নিউক্লিক অ্যাসিড অনুক্রমের সাথে আবদ্ধ হয়;রাসায়নিক সাবস্ট্রেটের উপস্থিতিতে অক্ষত লুসিফেরেজ প্রোটিন গঠন এবং নীল আলো নির্গত করার অনুমতি দেয়।.এই প্রক্রিয়ায় গ্রাস করা সাবস্ট্রেটের জন্য অ্যাকাউন্ট করার জন্য, গবেষকরা একটি নিয়ন্ত্রণ প্রতিক্রিয়া ব্যবহার করেছিলেন যা সবুজ আলো নির্গত করেছিল।একটি টিউব যা সবুজ থেকে নীল রঙ পরিবর্তন করে একটি ইতিবাচক ফলাফল নির্দেশ করে।
গবেষকরা RPA-LUNAS অ্যাস ডেভেলপ করে তাদের প্ল্যাটফর্ম পরীক্ষা করেছেন, যা সনাক্ত করেSARS-CoV-2 RNAক্লান্তিকর আরএনএ বিচ্ছিন্নতা ছাড়াই, এবং এর থেকে নাসোফ্যারিঞ্জিয়াল সোয়াব নমুনাগুলিতে তার ডায়গনিস্টিক কার্যকারিতা প্রদর্শন করেছেCOVID-19রোগীদেরRPA-LUNAS সফলভাবে SARS-CoV-2 শনাক্ত করেছে 20 মিনিটের মধ্যে একটি RNA ভাইরাল লোড সহ 200 কপি/μL কম।
গবেষকরা বিশ্বাস করেন যে তাদের পরীক্ষা সহজেই এবং কার্যকরভাবে অন্যান্য অনেক ভাইরাস সনাক্ত করতে পারে।"আরপিএ-লুনাস পয়েন্ট-অফ-কেয়ার সংক্রামক রোগ পরীক্ষার জন্য আকর্ষণীয়," তারা লিখেছেন।